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Inmunocirugía

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Inmunocirugía de un blastocisto. Se añaden anticuerpos que se adhieren a la capa más externa de células, que en un blastocisto es el trofoblasto. Tras eliminar los anticuerpos no unidos y añadir complemento, se destruyen las células del trofoblasto, dejando sólo la masa celular interna (MCI).[1]

La inmunocirugía es un método de eliminación selectiva de la capa celular externa (trofoblasto) de un blastocisto mediante un procedimiento de citotoxicidad. El protocolo de la inmunocirugía incluye la preincubación con un antisuero, el enjuague con un medio de derivación de células madre embrionarias para eliminar los anticuerpos, la exposición al complemento y, a continuación, la extracción del trofoectodermo lisado mediante una pipeta. Esta técnica se utiliza para aislar la masa celular interna del blastocisto. Las uniones celulares del trofoectodermo y el epitelio hermético "protegen" a la masa celular interna de la unión de anticuerpos haciendo que la célula sea impermeable a las macromoléculas.[2][3]

La inmunocirugía puede utilizarse para obtener grandes cantidades de masas celulares internas puras en un periodo de tiempo relativamente corto. La masa celular interna obtenida puede utilizarse para la investigación con células madre y su uso es mejor que el de las células madre adultas o fetales porque la MCI no se ha visto afectada por factores externos, como la bisección manual de la célula.[4][5]​ Sin embargo, si la integridad estructural del blastocisto se ve comprometida antes del experimento, la MCI es susceptible a la reacción inmunológica. Así pues, la calidad del embrión utilizado es imprescindible para el éxito del experimento. Además, cuando se utiliza complemento derivado de animales, la procedencia de los animales es importante. Deben mantenerse en un entorno libre de patógenos específicos para aumentar la probabilidad de que el animal no haya desarrollado anticuerpos naturales contra los carbohidratos bacterianos presentes en el suero (que puede obtenerse de un animal diferente).[6]

Solter y Knowles desarrollaron el primer método de inmunocirugía con su artículo de 1975 "Immunosurgery of Mouse Blastocyst". Lo utilizaron principalmente para estudiar el desarrollo embrionario temprano.[4][7]​ Aunque la inmunocirugía es el método más frecuente de aislamiento de la MCI, diversos experimentos han mejorado el proceso, por ejemplo mediante el uso de láseres (realizado por Tanaka, et al.) y micromanipuladores (realizado por Ding, et al.).[8][9]​ Estos nuevos métodos reducen el riesgo de contaminación con materiales animales dentro de las células madre embrionarias derivadas de la MCI, lo que puede causar complicaciones más adelante si las células madre embrionarias se trasplantan a un humano para terapia celular.

Referencias

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  1. Häggström, Mikael (2014). «Allogeneic component to overcome rejection in interspecific pregnancy». WikiJournal of Medicine 1 (1). doi:10.15347/wjm/2014.004. 
  2. Cruz, Y. P.; Treichel, R. S.; Harsay, E.; Chi, K. D. (1 de enero de 1993). «Mouse Blastocyst Immunosurgery with Commercial Antiserum to Mouse Erythrocytes». In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal. 29A (8): 671-675. JSTOR 4294104. PMID 8376320. S2CID 7019136. doi:10.1007/BF02634557. 
  3. Nichols, Jennifer; Boroviak, Thorsten (2015). «Maximizing Clonal Embryonic Stem Cell Derivation by ERK Pathway Inhibition». Embryonic Stem Cell Protocols. Methods in Molecular Biology 1341. pp. 1-13. ISBN 978-1-4939-2953-5. PMID 26026883. doi:10.1007/7651_2015_253. 
  4. a b Solter, D; Knowles, BB (1975). «Immunosurgery of mouse blastocyst». Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 72 (12): 5099-102. Bibcode:1975PNAS...72.5099S. PMC 388883. PMID 1108013. doi:10.1073/pnas.72.12.5099. 
  5. Crook, Jeremy M.; Kravets, Lucy; Peura, Teija; Firpo, Meri T. (2017). «Derivation of Human Embryonic Stem Cells». Stem Cell Banking. Methods in Molecular Biology 1590. pp. 115-129. ISBN 978-1-4939-6919-7. PMID 28353265. doi:10.1007/978-1-4939-6921-0_8. 
  6. “Production of Chimeras,” Chapter 11, in Manipulating the Mouse Embryo, 3rd edition, by Andras Nagy, Marina Gertsenstein, Kristina Vintersten, and Richard Behringer. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, USA, 2003.
  7. Amit, Michal (2013). «Sources and Derivation of Human Embryonic Stem Cells». Pluripotent Stem Cells. Methods in Molecular Biology 997. pp. 3-11. ISBN 978-1-62703-347-3. PMID 23546743. doi:10.1007/978-1-62703-348-0_1. 
  8. Tanaka, Noriko; Takeuchi, Takumi; Neri, Queenie V.; Sills, Eric Scott; Palermo, Gianpiero D. (1 de enero de 2006). «Laser-assisted blastocyst dissection and subsequent cultivation of embryonic stem cells in a serum/cell free culture system: applications and preliminary results in a murine model». Journal of Translational Medicine 4: 20. ISSN 1479-5876. PMC 1479373. PMID 16681851. doi:10.1186/1479-5876-4-20. 
  9. Yan Ding, Yi Gan, Jing Bo Feng, Shao Hua Qi, Rui Ming Li, Dong Sheng Li. "Efficient isolation inner cell mass from blastocysts by improved microsurgical technique". Cell Research (2008) 18:s39. doi: 10.1038/cr.2008.129; published online 4 de agosto de 2008

Enlaces externos

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