Rozgrywki toczyły się w trzech grupach: Nord (Północ), West (Zachód) oraz Süd (Południe) i występowało w nich łącznie 54 drużyny. Po zakończeniu sezonu mistrzowie każdej grupy awansowali bezpośrednio do 3. Ligi, zaś najsłabsze drużyny z każdej grupy spadały do Oberligi.
Hansa Rostock II (12 miejsce) nie otrzymała licencji na grę w Regionallidze i w sezonie 2010/11 będzie występowała w Oberlidze Nordost-Nord, a że z wolnego miejsca w Regionallidze rezygnowała Tennis Borussia Berlin (15 miejsce), dzięki czemu FC Oberneuland utrzymał się w Regionallidze.
Rot-Weiss Essen (5 miejsce) oraz Bonner SC (10 miejsce) nie otrzymali licencji na grę w Regionallidze i w sezonie 2010/11 będą występowali w NRW-Lidze, dzięki czemu Borussia Mönchengladbach II i Eintracht Trewir utrzymali się w Regionallidze.
SSV Reutlingen 05 (14 miejsce) oraz SV Waldhof Mannheim (14 miejsce w RL West) nie otrzymali licencji na grę w Regionallidze i w sezonie 2010/11 będą występowali w Oberlidze Baden-Württemberg, dzięki czemu SV Wehen Wiesbaden II i Wormatia Worms utrzymali się w Regionallidze.
SSV Ulm 1846 i SV Wehen Wiesbaden II spadły do Oberligi 2010/11.
SpVgg Weiden spadł do Bezirksoberligi 2011/12 (nie otrzymał licencji na grę w Oberlidze 2011/12 i w następnym sezonie będzie występował w Bezirksoberlidze Oberpfalz – siódmy poziom rozgrywek), gdzie zajmie miejsce drużyny rezerw.
SpVgg Weiden (1 grudnia 2010) oraz SSV Ulm 1846 (3 stycznia 2011) - w klubach ogłoszenie postępowania upadłościowego, a wyniki ich dotychczas rozegranych meczów zostały anulowane.