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放射 ほうしゃ 免疫 めんえき 分析 ぶんせき 所 しょ 采 さい 用 よう 的 てき 竞争性 せい 免疫 めんえき 结合反 はん 应
放射 ほうしゃ 免疫 めんえき 分析 ぶんせき (英語 えいご :radioimmunoassay ,RIA)又 また 称 しょう 放射 ほうしゃ 免疫 めんえき 测定 ,简称放免 ほうめん 或 ある 放免 ほうめん 法 ほう ,是 ぜ 一种在无须采用生物 せいぶつ 测定方法 ほうほう 的 てき 情 じょう 况下,利用 りよう 放射 ほうしゃ 性 せい 核 かく 素 もと 示 しめせ 踪技术和 かず 免疫 めんえき 学 がく 抗原 こうげん 抗体 こうたい 特 とく 异性相 しょう 结合,再 さい 通 つう 过测定 てい 放射 ほうしゃ 性 せい 来 らい 分析 ぶんせき 体内 たいない 微量 びりょう 成分 せいぶん 的 てき 分析 ぶんせき 技 わざ 术;用 よう 于检测抗原 こうげん (例 れい 如血清 けっせい 之 これ 中 なか 激 げき 素 もと 的 てき 水平 すいへい )的 てき 实验室 しつ 测定方法 ほうほう 。
这一方法 ほうほう 是 ぜ 由 ゆかり 羅 ら 莎琳·薩斯曼·耶洛和 わ Solomon Berson 于1950年代 ねんだい 创建的 てき [ 1] 。耶洛因 いん 建立 こんりゅう 胰岛素 もと 的 てき RIA检测方法 ほうほう 而获1977年 ねん 诺贝尔生理学 せいりがく 或 ある 医学 いがく 奖 :对此类微量 びりょう 激 げき 素 もと 的 てき 精 せい 确测定 てい 在 ざい 当 とう 时的内分泌 ないぶんぴつ 学 がく 领域被 ひ 认为是 ぜ 一 いち 项突破 とっぱ 。
RIA的 てき 基本 きほん 原理 げんり 为:放射 ほうしゃ 性 せい 同位 どうい 素 もと 标记的 てき 抗原 こうげん (简称“标记抗原 こうげん ”)和 かず 非 ひ 标记抗原 こうげん (标准抗原 こうげん 或 ある 待 まち 测抗原 こうげん )同 どう 时与数量 すうりょう 有限 ゆうげん 的 てき 特 とく 异性抗体 こうたい 之 これ 间发生 せい 竞争性 せい 结合(抗原 こうげん -抗体 こうたい 反 はん 应)。由 よし 于标记抗原 こうげん 与 あずか 待 まち 测抗原 こうげん 的 てき 免疫 めんえき 活性 かっせい 完全 かんぜん 相 しょう 同 どう ,对特异性抗体 こうたい 具有 ぐゆう 同 どう 样的亲和力 りょく ,当 とう 标记抗原 こうげん 和 わ 抗体 こうたい 为数量 すうりょう 恒 つね 定 てい 时,待 まち 测抗原 はら 和 かず 标记抗原 こうげん 的 てき 总量大 だい 于抗体 たい 上 じょう 的 てき 有效 ゆうこう 结合点 がてん 时,标记抗原 こうげん -抗体 こうたい 复合物的 ぶってき 形成 けいせい 将 はた 随 ずい 着 ぎ 待 まち 测抗原 こうげん 量的 りょうてき 增加 ぞうか 而减少 しょう ,而非结合的 てき 或 ある 游 ゆう 离的标记抗原 こうげん 则随着 ぎ 待 まち 测抗原 こうげん 数量 すうりょう 的 てき 增加 ぞうか 而增加 ぞうか (也就是 ぜ 所 しょ 谓的竞争结合反 はん 应 ),因 いん 此测定 てい 标记抗原 こうげん -抗体 こうたい 或 ある 标记抗原 こうげん 即 そく 可 か 推出待 まち 测抗原 こうげん 的 てき 数量 すうりょう 。
抗原 こうげん 的 てき 放射 ほうしゃ 性 せい 标记常常 つねづね 是 ぜ 利用 りよう 碘 发射γ がんま 射 い 线的 てき 放射 ほうしゃ 性 せい 同位 どうい 素 もと 与 あずか 酪氨酸 さん 结合来 らい 实现的 てき 。病人 びょうにん 血清 けっせい 等 とう 标本之 の 中 ちゅう 所 しょ 含的是 ぜ 未 み 经放射 ほうしゃ 性 せい 标记的 てき 抗原 こうげん (亦 また 可 か 称 しょう 为“冷 ひや ”抗原 こうげん ),即 そく 待 まち 测抗原 こうげん 。总体上 じょう 来 らい 说,特 とく 异性抗体 こうたい 之 の 上 うえ 抗原 こうげん 结合部位 ぶい 的 てき 数量 すうりょう 是 ぜ 有限 ゆうげん 的 てき 。相 あい 对有限 げん 的 てき 抗原 こうげん 结合部位 ぶい 而言,标记抗原 こうげん 与 あずか 待 まち 测抗原之 はらの 间属于竞争 そう 关系。通 つう 过绘制 せい 结合曲 きょく 线,即 そく 可 か 计算出 さんしゅつ 病人 びょうにん 血清 けっせい 之 の 中 ちゅう 待 まち 测抗原 こうげん 的 てき 确切数量 すうりょう 。
在 ざい 采 さい 用 よう 这种方法 ほうほう 的 てき 时候,结合抗原 こうげん 与 あずか 非 ひ 结合抗原 こうげん 之 の 间的分 ぶん 离至关重要 じゅうよう 。最初 さいしょ ,为了沉淀 和 わ 离心 抗原 こうげん -抗体 こうたい 反 はん 应所形成 けいせい 的 てき 免疫 めんえき 复合物 ぶつ ,分 ふん 离方法 ほう 采 さい 用 よう 的 てき 是 ぜ 针对第 だい 一 いち 抗体 こうたい 的 てき 第 だい 二 に 抗体 こうたい 。后 きさき 来 らい ,在 ざい 对T3 和 わ T4 进行RIA测定时,哥伦比 ひ 亚大学 がく 的 てき Werner和 わ Acebedo对RIA方法 ほうほう 进行了 りょう 扩展,采 さい 用 よう 活性炭 かっせいたん 悬浊液 えき 进行沉淀[ 2] 。1975年 ねん ,Acebedo和 わ Hayek等 とう 人 じん 在 ざい BBRC之 の 上 うえ 发表了 りょう 人 じん TSH 的 てき 超 ちょう 微量 びりょう RIA法 ほう [ 3] 。
RIA技 わざ 术极其敏感 びんかん 而又极其特 とく 异 ,但 ただし 自動 じどう 化 か 機 き 台 だい 的 てき 取得 しゅとく 卻較受限,且成本 ほん 也不低 ひく 。同 どう 时,RIA还需要 じゅよう 特殊 とくしゅ 的 てき 预防措施,因 いん 为其要用 ようよう 到 いた 放射 ほうしゃ 性 せい 物 ぶつ 质。因 よし 此,如今RIA在 ざい 很大程度 ていど 上 じょう 已 やめ 经被ELISA 所 ところ 取 と 代 だい 。就ELISA 而言,抗原 こうげん -抗体 こうたい 反 はん 应的测定采 さい 用 よう 的 てき 是 ぜ 颜色变化 信号 しんごう ,而不是 ぜ 放射 ほうしゃ 性 せい 信号 しんごう 。
^ Yalow RS, Berson SA. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man. J Clin Invest 1960;39:1157-75. PMID 13846364 .
^ Werner SC, Acebedo G, Radichevich I. Rapid radioimmunoassay for both T4 and T3 in the same sample of human serum . J. Clin. Endocrinol. Metab. 1974, 38 (3): 493–5. PMID 4815178 .
^ Acebedo G, Hayek A, Klegerman M, Crolla L, Bermes E, Brooks M. A rapid ultramicro radioimmunoassay for human thyrotropin. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1975, 65 (2): 449–56. PMID 1148002 . doi:10.1016/S0006-291X(75)80168-9 .