WI-38

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體外たいがい培養ばいよう的てきWI-38細胞さいぼう（左ひだり：高密度こうみつど時じ的てき圖像ずぞう。右みぎ：低てい密度みつど時じ的てき圖像ずぞう）

WI-38是ぜ一いち種しゅ生物せいぶつ醫學いがく領域りょういき常用じょうよう的てき細胞さいぼう系けい，其本質ほんしつ爲ため體外たいがい（in vitro）培養ばいよう的てき人じん胚はい肺はい成なり纖維せんい細胞さいぼう。該細胞さいぼう系けい由美ゆみ國こく生物せいぶつ學がく家か雷かみなり納おさめ德とく·海うみ弗どる里さと克かつ（英えい语：Leonard Hayflick）於1960年ねん建立こんりゅう。

WI-38細胞さいぼう爲ため有限ゆうげん細胞さいぼう系けい，一般いっぱん在ざい培養ばいよう50代だい左右さゆう後會こうかい衰おとろえ老ろう死亡しぼう，理論りろん上じょう，WI-38細胞さいぼう最終さいしゅう會かい徹底てってい耗盡。但ただし因よし爲ため海うみ弗どる里さと克かつ在ざい1960年代ねんだい建けん系けい時じ凍こお存そん了りょう數すう百ひゃく管かん傳でん代だい8次じ的てき原はら代だい培養ばいよう人じん胚はい肺はい成なり纖維せんい細胞さいぼう（即そく後來こうらい的てきWI-38細胞さいぼう），因いん此，WI-38細胞さいぼう能のう在ざい相當そうとう長ちょう一段時間內滿足研究者的需求。根據こんきょ一いち篇へん發表はっぴょう於1976年ねん的てき文章ぶんしょう，即そく使つかい只ただ討論とうろん一半由海弗里克凍存的WI-38細胞さいぼう，也需要じゅよう自じ那な時じ起おこり66年ねん後ごWI-38細胞さいぼう才ざい會かい徹底てってい用よう盡つき[1]。

與あずか通常つうじょう爲ため非ひ整せい倍ばい體たい的てき永生えいせい化か細胞さいぼう系けい（如腫瘤こぶ細胞さいぼう、轉化てんか處理しょり後ご的てき細胞さいぼう）不同ふどう，WI-38細胞さいぼう在ざい體外たいがい培養ばいよう時じ基もと因いん組ぐみ能のう維持いじ二に倍ばい體たい狀態じょうたい，各かく方面ほうめん的てき性狀せいじょう均ひとし與あずか正常せいじょう細胞さいぼう接近せっきん。加か上じょうWI-38細胞さいぼう的てき差異さい較不同ふどう的てき原はら代だい培養ばいよう細胞さいぼう株かぶ之の間あいだ的てき差異さい小しょう，因いん而WI-38在ざい生命せいめい科學かがく領域りょういき得え到いた了りょう廣こう泛的應用おうよう。WI-38尤ゆう其常用じょうよう於疫苗なえ研けん製せい或ある腫しゅ瘤こぶ發生はっせい機き理り的てき研究けんきゅう[2]。但ただし因よし爲ためWI-38細胞さいぼう系けい來らい自じ人工じんこう流產りゅうざん的てき，且沒有ゆう經過けいか胎兒たいじ母親ははおや的てき知ち情じょう同意どうい，WI-38細胞さいぼう引起了りょう一定いってい的てき倫理りんり學がく爭議そうぎ[3]。

特徵とくちょう[编辑]

圖ずA爲ため低てい傳つて代數だいすう（上うえ）及高傳でん代數だいすう（下した）的てきWI-38細胞さいぼうβべーた-半はん乳糖にゅうとう苷酶活性かっせい分析ぶんせき，藍色あいいろ越こし深ふかし說明せつめい該部位い酶活性せい越えつ強きょう。此圖說明せつめい高だか傳でん代數だいすう的てき衰おとろえ老ろうWI-38細胞さいぼうβべーた-半はん乳糖にゅうとう苷酶活性かっせい更さら高だか。圖ずB爲ため低てい傳つて代數だいすう及高傳でん代數だいすう的てきWI-38Western Blot（西方にしかた墨ぼく點てん法ほう）分析ぶんせき結果けっか。可か以說明せつめい高だか傳でん代數だいすう的てき衰おとろえ老ろうWI-38細胞さいぼうp53、p16蛋白たんぱく表ひょう達たち明あかり顯あらわ升ます高だか，而SIRT1、HuR基もと因いん表ひょう達たち下降かこう（βべーた-肌はだ動どう蛋白たんぱく（βべーた-actin）爲ため內參，用よう於指示しじ各かく泳およげ道どう的てき總そう蛋白たんぱく量りょう大だい致相等とう）。此圖來き自じ伯はく納おさめ德とく·S·馬ば拉ひしげ薩（Bernard S. Marasa）等とう於2010年ねん發表はっぴょう於開放かいほう獲え取ど學術がくじゅつ期き刊かん《衰おとろえ老ろう》（Aging (Albany NY)）上じょう的てき一いち篇へん文章ぶんしょう[4]

WI-38的てき本質ほんしつ爲ため體外たいがい培養ばいよう的てき人じん胚はい肺はい成なり纖維せんい細胞さいぼう，通過つうか相差おうさつ顯微鏡けんびきょう等ひとし可か以觀察到，體外たいがい培養ばいよう的てきWI-38細胞さいぼう的てき形態けいたい成なり梭形，界さかい限げん較模糊もこ。細胞さいぼう核かく體積たいせき較大，呈てい圓形えんけい，可能かのう含有がんゆう多た個こ核かく仁ひとし[5][6]。與あずか常用じょうよう的てき永生えいせい化か細胞さいぼう系けい不同ふどう，WI-38爲ため有限ゆうげん細胞さいぼう系けい，在ざい體外たいがい培養ばいよう時じ能のう維持いじ二に倍ばい體たい狀態じょうたい，各かく方面ほうめん特性とくせい與あずか正常せいじょう的てき體からだ細胞さいぼう更さら接近せっきん。WI-38細胞さいぼう在ざい培養ばいよう的てき早期そうき，細胞さいぼう分裂ぶんれつ相對そうたい較快。但ただし培養ばいよう到いた一定いってい代數だいすう後ご（大約たいやく在ざい細胞さいぼう分裂ぶんれつ50次じ左右さゆう後ご），細胞さいぼう開始かいし整體せいたい衰おとろえ老おい，分裂ぶんれつ會かい開始かいし減げん緩なる，甚至細胞さいぼう數すう目め不ふ會かい進しん一いち步ほ增加ぞうか（此現象げんしょう稱しょう爲ため海うみ弗どる里さと克かつ極限きょくげん）。隨ずい着ぎ細胞さいぼう進しん一いち步ほ衰おとろえ老おい，細胞さいぼう會かい開始かいし大だい面積めんせき凋亡，直ちょく至いたり最後さいご全部ぜんぶ死亡しぼう。根據こんきょ端はし粒つぶ酶學說がくせつ，上述じょうじゅつ現象げんしょう是ぜ由ゆかり端はし粒つぶ縮ちぢみ短たん造成ぞうせい。當とう細胞さいぼう分裂ぶんれつ到いた一定いってい次數じすう後ご，染色せんしょく體たい兩りょう端はし的てき端はし粒つぶ序列じょれつ已やめ用よう盡つき，更さら內部的てき編へん碼區域くいき開始かいし被ひ截短，造成ぞうせい細胞さいぼう衰おとろえ老ろう死亡しぼう[7][8]。但ただし研究けんきゅう者しゃ根據こんきょ需要じゅよう可か以使用しよう射い線せん照射しょうしゃ、病毒びょうどく轉化てんか等とう手段しゅだん處理しょりWI-38細胞さいぼう使し其永生せい化か。永生えいせい化か後ご的てきWI-38能のう夠無限げん生長せいちょう分裂ぶんれつ，但ただし同時どうじ染色せんしょく體たい組ぐみ等とう性狀せいじょう也會發生はっせい變化へんか[9][10][11]。

研究けんきゅう表明ひょうめい，WI-38細胞さいぼう爲ため終末しゅうまつ分化ぶんか的てき細胞さいぼう，不ふ再さい具有ぐゆう任にん何なん分化ぶんか潛せん能のう[5]。

培養ばいよう方法ほうほう[编辑]

研究けんきゅう人員じんいん可か以從ATCC（美国びくに典型てんけい培つちかえ养物保藏やすぞう中心ちゅうしん）等とう機構きこう購入こうにゅうWI-38細胞さいぼう。在ざい收おさむ到いた凍こお存そん的てきWI-38細胞さいぼう後ご，對たい其進行しんこう復ふく甦よみがえ。體外たいがい培養ばいようWI-38細胞さいぼう使用しよう加か有ゆう10%胎牛血清けっせい（FBS）的てきDMEM或あるEMEM等とう最小さいしょう限度げんど培養基ばいようき培養ばいよう即そく可か。平時へいじ，WI-38應おう放ひ在ざい含有がんゆう5%二に氧化碳的てき37攝氏せっし度ど無菌むきん培養ばいよう箱ばこ中ちゅう。另外，可か以根據こんきょ需要じゅよう，向こう培養基ばいようき中ちゅう加入かにゅう1%青黴あおかび素もと-鏈黴素もと以減少げんしょう細菌さいきん污染風ふう險けわし。WI-38傳つて代だい時じ，使用しよう0.25%胰酶消化しょうか細胞さいぼう，處理しょり後ご再さい以1:2-1:4的てき比例ひれい將はた細胞さいぼう轉入てんにゅう新しん的てき培養ばいよう皿さら中ちゅう。如需凍存そんWI-38細胞さいぼう，應おう使用しよう95%培養基ばいようき+5%DMSO配はい成なり的てき凍こお存そん液えき懸かか浮細胞さいぼう後ご放ひ入いれ液えき氮中ちゅう儲もうか存そん[12][13][14]。

應用おうよう[编辑]

相あい較經過けいか惡性あくせい轉化てんか或ある本身ほんみ就是腫しゅ瘤こぶ細胞さいぼう的てき永生えいせい細胞さいぼう系けい，WI-38更さら接近せっきん於正常つね狀態じょうたい下か的てき人體じんたい細胞さいぼう。因よし此，WI-38細胞さいぼう系けい在ざい疫苗研けん發はつ及腫瘤こぶ生物せいぶつ學がく研究けんきゅう中ちゅう佔有重要じゅうよう的てき地位ちい。

疫苗研けん發はつ[编辑]

WI-38在ざい體外たいがい培養ばいよう時じ性狀せいじょう與あずか正せい常體じょうたい細胞さいぼう接近せっきん，且能保持ほじ二に倍ばい體からだ染色せんしょく體たい組ぐみ，適てき合作がっさく培養ばいよう致病病毒びょうどく的てき宿主しゅくしゅ，因いん此受到了りょう疫苗研とぎ發はつ者しゃ的てき歡迎かんげい。WI-38細胞さいぼう十分作爲致病病毒培養的宿主[15]。實際じっさい上じょう，在ざい1960年代ねんだい，海うみ弗どる里さと克かつ建立こんりゅうWI-38細胞さいぼう系けい的てき初はつ衷正是ぜ爲ため了りょう方便ほうべん疫苗的てき研とぎ發はつ[16]。

在ざい1970年代ねんだい，供きょう職しょく於威斯塔研究所けんきゅうじょ（Wistar Institution）的てき斯坦利り·普ふ洛らく特金とっきん（Stanley Plotkin）通過つうか在ざい30攝氏せっし度ど條件下じょうけんか於WI-38細胞さいぼう中ちゅう培養ばいよう風疹ふうしん病毒びょうどく（英えい语：rubella），成功せいこう製せい得とく了りょう低てい副作用ふくさよう的てき減げん毒どく風疹ふうしん疫苗。該疫苗なえ直ちょく到いた今こん天てん還かえ是ぜ美國びくに唯ただ一いち採用さいよう的てき風疹ふうしん疫苗[17]。此外，脊髓せきずい灰はい质炎病毒びょうどく等とう疫苗也是通過つうかWI-38細胞さいぼう製せい得とく[18]。統計とうけい表明ひょうめい，WI-38細胞さいぼう極大きょくだい促進そくしん了りょう疫苗產業さんぎょう的てき發展はってん，已やめ帶たい給きゅう疫苗產業さんぎょう超過ちょうか10億おく美び金的きんてき收益しゅうえき[16][19]。

腫しゅ瘤こぶ生物せいぶつ學がく研究けんきゅう[编辑]

在ざい腫しゅ瘤こぶ生物せいぶつ學がく研究けんきゅう中ちゅう，WI-38可か以作爲さくい代表だいひょう正常せいじょう細胞さいぼう的てき實驗じっけん組ぐみ或ある對照たいしょう組ぐみ。比ひ如，研究けんきゅう者しゃ可か以用WI-38作さく對照たいしょう組ぐみ研究けんきゅう抗こう癌がん藥物やくぶつ/療法りょうほう對たい正常せいじょう細胞さいぼう有無うむ殺傷さっしょう作用さよう等とう，亦また可か以用WI-38作爲さくい模型もけい確認かくにん某ぼう種たね方法ほうほう是ぜ否ひ能のう有效ゆうこう減げん輕けい接受せつじゅ某ぼう一いち抗こう癌がん療法りょうほう的てき副作用ふくさよう[20][21]。另外，腫しゅ瘤こぶ生物せいぶつ學がく研究けんきゅう者しゃ亦また可か以用WI-38研究けんきゅう致癌因子いんし的てき作用さよう。比ひ如，研究けんきゅう者しゃ如果想そう確認かくにん某ぼう一病毒對腫瘤的形成是否有促進作用，可か以在體外たいがい用よう此病毒びょうどく感染かんせんWI-38細胞さいぼう，再さい觀察かんさつ接受せつじゅ過か此種處理しょり的てきWI-38發生はっせい惡性あくせい轉化てんか的てき機き率りつ是ぜ否ひ提ひさげ高だか[22]。

歷史れきし[编辑]

1962年ねん，一いち位い婦女ふじょ在ざい瑞みず典てん一家醫院實行了合法的墮胎手術。隨ずい後ご，胎兒たいじ的てき屍體したい被ひ裝そう入にゅう了りょう冰盒中ちゅう，送おく到いた了りょう當時とうじ在ざい美國びくに賓まろうど夕ゆう法ほう尼あま亞あ州しゅう威い斯塔研究所けんきゅうじょ供きょう職しょく的てき雷かみなり納おさめ德とく·海うみ弗どる里さと克かつ雷かみなり納おさめ德とく·海うみ弗どる里さと克かつ（英えい语：Leonard Hayflick）處しょ。海うみ弗どる里さと克かつ在ざい此前已やめ經けい利用りよう賓まろうど州しゅう本地ほんじ的てき人工じんこう流產りゅうざん胎兒たいじ建立こんりゅう了りょう名めい爲ためWI-1到いたWI-25的てき25個こ胚胎はいたい成なり纖維せんい細胞さいぼう系けい[13][23]。值得注意ちゅうい的てき是ぜ，當時とうじ墮胎だたい在ざい賓まろうど州しゅう原則げんそく上じょう是非ぜひ法ほう的てき[23]。海うみ弗どる里さと克かつ利用りよう這25個こ細胞さいぼう系けい發現はつげん了りょう海うみ弗どる里さと克かつ極限きょくげん[8]，爲ため後來こうらい獲得かくとく諾だく貝かい爾なんじ生理せいり醫學いがく獎的てき端はし粒つぶ酶研究けんきゅう打だ下か了りょう基礎きそ[24]。但ただし這次，海うみ弗どる里さと克かつ決定けってい用よう得え到いた的てき胚胎はいたい建立こんりゅう一個能用於疫苗研發的穩定細胞系。在ざい將しょう該胚胎はいたい的てき肺はい成なり纖維せんい進行しんこう原ばら代だい培養ばいよう，並なみ傳でん代だい到いた第だい8代だい後ご，海うみ弗どる里さと克かつ僱傭了りょう大量たいりょう的てき技術ぎじゅつ人員じんいん，在ざい短時間たんじかん內將這些細胞さいぼう移入いにゅう數すう百ひゃく個こ安やす瓿瓶凍こお存そん，成なり爲ためWI-38細胞さいぼう系けい的てき基礎きそ。隨ずい後ご，海うみ弗どる里さと克かつ得知とくち自己じこ用よう來らい製作せいさくWI-38細胞さいぼう系けい的てき胎兒たいじ家系かけい無む遺傳いでん病びょう和わ癌がん症しょう——這表明ひょうめいWI-38細胞さいぼう系けい適合てきごう用よう於疫苗なえ的てき研とぎ發はつ。1968年ねん，海うみ弗どる里さと克かつ從したがえ威い斯塔研究所けんきゅうじょ辭職じしょく，前ぜん往加州かしゅう的てき斯坦福ぶく大學だいがく醫學いがく微生物びせいぶつ系けい任にん教授きょうじゅ。這也引發了りょう至いたり今いま懸かか而未決みけつ的てきWI-38細胞さいぼう歸屬きぞく權けん問題もんだい。當時とうじ，就WI-38細胞さいぼう的てき歸屬きぞく權けん問題もんだい爆發ばくはつ了りょう矛盾むじゅん。後來こうらい，經過けいか美國びくに國立こくりつ衛生えいせい研究けんきゅう院いん（NIH）的てき調停ちょうてい，海うみ弗どる里さと克かつ與あずか威い斯塔研究所けんきゅうじょ可か以各得とく10個こ安やす瓿瓶的てきWI-38細胞さいぼう，其餘WI-38細胞さいぼう則そく全ぜん歸きATCC（美国びくに典型てんけい培つちかえ养物保藏やすぞう中心ちゅうしん）所有しょゆう。海うみ弗どる里さと克かつ雖然接受せつじゅ了りょう該協議きょうぎ，但ただし他た本人ほんにん對たい此並不滿ふまん意い[16][23]。

在ざい斯坦福ぶく大學だいがく任にん職しょく期間きかん，海うみ弗どる里さと克かつ向むこう每ごと位い找他索さく取とWI-38細胞さいぼう的てき研究けんきゅう者しゃ索さく取と15美び金的きんてき費用ひよう——這和ATCC收おさむ取的とりてき運うん費ひ相等そうとう。這引起おこり了りょうNIH的てき不滿ふまん[16]。NIH隨ずい後ご發起ほっき了りょう對たい海うみ弗どる里さと克かつ的てき調ちょう查。最後さいご，調しらべ查小組ぐみ認定にんてい海うみ弗どる里さと克かつ對たい索さく要ようWI-38細胞さいぼう的てき研究けんきゅう者しゃ收おさむ費ひ是ぜ「侵おかせ吞美國こく國家こっか財產ざいさん」。另外，小しょう組ぐみ還かえ指出さしで，他た的てき一いち些WI-38細胞さいぼう已やめ經けい被ひ細菌さいきん污染[1]。1976年ねん，海うみ弗どる里さと克かつ從したがえ斯坦福ぶく大學だいがく辭職じしょく。在ざい此前一いち年ねん，NIH的てき工作こうさく人員じんいん在ざい他た外出がいしゅつ開會かいかい期間きかん沒收ぼっしゅう了りょう他た實驗じっけん室しつ剩あま下した的てきWI-38細胞さいぼう。隨ずい後ご，海うみ弗どる里さと克かつ找到了りょう一いち份新工作こうさく，獲得かくとく了りょうNIH的てき基金ききん並なみ拿回了りょう一いち小しょう部分ぶぶんWI-38細胞さいぼう[16][25]。

倫理りんり學がく爭議そうぎ[编辑]

WI-38細胞さいぼう的てき來らい源げん爲ため人工じんこう流產りゅうざん後こう的てき人じん胚胎はいたい，更さら具體ぐたい地ち說せつ是ぜ取と自じ這些胚胎はいたい的てき肺はい部ぶ成なり纖維せんい細胞さいぼう[3]。上述じょうじゅつ事實じじつ引起了りょう倫理りんり學がく上じょう的てき爭議そうぎ，而且這種爭議そうぎ直ちょく到いた今こん天てん仍然存在そんざい[23]。反はん墮胎だたい活動かつどう人士じんし一いち直ちょく反對はんたいWI-38細胞さいぼう的てき應用おうよう。部分ぶぶん社會しゃかい活動かつどう人士じんし拒絕きょぜつ使用しよう利用りようWI-38研とぎ發はつ的てき疫苗等とう產品さんぴん[16]。社會しゃかい活動かつどう人士じんし黛まゆずみ比ひ·溫ぬる內奇（Debi Vinnedge）表示ひょうじ，研とぎ發はつ疫苗完全かんぜん可か以用那な些不存在そんざい倫理りんり學がく爭議そうぎ的てき細胞さいぼう系けい進行しんこう，但ただし研とぎ發はつ者しゃ卻仍然しか一いち直ちょく使用しようWI-38細胞さいぼう系けい[16]。那な位い1962年ねん實行じっこう了りょう墮胎だたい手術しゅじゅつ的てき瑞みず典てん女性じょせい（她並不ふ願意がんい公開こうかい自己じこ的てき姓名せいめい）在ざい接受せつじゅ專せん訪おとずれ時じ表示ひょうじ，她對自己じこ人工じんこう流產りゅうざん後ご的てき胎兒たいじ在ざい未み經けい允許いんきょ的てき情況じょうきょう下か被ひ用よう於研究けんきゅう感かん到いた十分じゅうぶん憤怒ふんぬ[3]。但ただし一位科學家在接受自然雜誌專訪時表示，WI-38細胞さいぼう確實かくじつ拯救了りょう數すう百ひゃく萬まん人にん的てき生命せいめい。WI-38細胞さいぼう系けい的てき建立こんりゅう者しゃ雷かみなり納おさめ德とく·海うみ弗どる里さと克かつ在ざい一いち篇へん與あずかS.J.奧おく利とし尚なお斯基（S. J. Olshansky）合ごう著ちょ的てき文章ぶんしょう中ちゅう表示ひょうじ，WI-38細胞さいぼう促成そくせい了りょう許多きょた疫苗的てき問とい世よ，減少げんしょう了りょう這些疾病しっぺい的てき患病率りつ，拯救了りょう無む數すう人にん的てき生命せいめい[19]。

參まいり見み[编辑]

參考さんこう[编辑]

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