(Translated by https://www.hiragana.jp/)
Cre-Lox重组 - 维基百科，自由的百科全书 跳とべ转到内容ないよう

Cre-Lox重じゅう组

维基百科ひゃっか，自由じゆう的てき百科ひゃっか全ぜん书

Cre-Lox重じゅう组是ぜ一种用于在细胞DNA的てき特定とくてい位い点てん上じょう进行删除、插入そうにゅう、转座和わ倒たおせ位い操作そうさ的てき位い点てん特とく异性重じゅう组酶技わざ术，其特点在てんざい于可以让DNA修おさむ改あらため对指定してい的てき特定とくてい细胞群ぐん进行，或ある是ぜ使し修おさむ改あらため过程由よし特定とくてい的てき外部がいぶ刺激しげき所しょ触さわ发。此技术对真ま核かく和わ原核げんかく细胞都と适用。特とく别地，对研究けんきゅう由よし各かく种复杂细胞和神しん经通路ろ复合而形成けいせい认知行ぎょう为的大だい脑的神かみ经生物せいぶつ学がく家か而言，这种技わざ术已被ひ证明是ぜ相当そうとう实用的てき。

这个重じゅう组体系けい由よし单个酶组成なり，即そく可か以让一对被称为Lox序列じょれつ的てき短目みじかめ标序列じょれつ进行重じゅう组的てきCre重じゅう组酶，除じょ此之外がい不ふ需要じゅよう插入そうにゅう其他的てき额外蛋白たんぱく或ある序列じょれつ。Cre重じゅう组酶和かず源はじめLox序列じょれつ（即そくLoxP序列じょれつ）是ぜ从P1噬菌体たい中ちゅう获取的てき。

通つう过合适地插入そうにゅうLox序列じょれつ可か以使特定とくてい基もと因いん活かつ化か、沉默或ある者もの和わ其他基もと因いん交换位置いち——在ざいDNA的てき层面上じょう，许多操作そうさ都と可か以进行ぎょう。Cre酶的活性かっせい可か控ひかえ，可か以使之の只ただ在ざい一种特定细胞类型中表达，也可以使之の由よし特定とくてい的てき外部がいぶ刺激しげき（如化学がく信号しんごう、热刺激しげき）触さわ发表达。这些特とく异性DNA修おさむ饰对细胞系けい追つい踪以及有致命ちめい性せい的てき突变研究けんきゅう十じゅう分ふん有效ゆうこう。

Cre-Lox重じゅう组系统在操作そうさ和わ用よう途上とじょう都と与あずかFLP-FRT重じゅう组系けい统十じゅう分ふん相似そうじ。[1]

历史

[编辑]

Cre-Lox重じゅう组是一いち种由Brian Sauer博士はかせ发明的てき特殊とくしゅ的てき位い点てん特とく异性重じゅう组技わざ术，最初さいしょ用よう于在哺乳ほにゅう动物细胞系けい中ちゅう激げき活かつ基もと因いん表ひょう达。[2][3] 之これ后きさき，Jamey Marth博士はかせ的てき研究けんきゅう团队发现了りょうCre-Lox可か以对转基因いん动物体内たいない特殊とくしゅT细胞中なか由ゆかりloxP序列じょれつ所しょ夹的染色せんしょく体たいDNA进行高だか效こう地ち删除，他た们由此提出ていしゅつ这一技术可以用于确定特定细胞类型中内源基因的功能、标记细胞命いのち运决定じょう中ちゅう的てき祖そ细胞、诱导染色せんしょく体重たいじゅう组以构建疾病しっぺい生物せいぶつ学がく模型もけい、以及确定早期そうき基もと因いん损伤对疾病びょう发展的てき作用さよう。[4]

不ふ久ひさ，就已经有研究けんきゅう者しゃ报道获得了りょう具有ぐゆうloxP侧位（floxed）DNA聚合酶基因いん的てき多能たのう胚胎はいたい干ひ细胞。[5] 结合上述じょうじゅつ的てき发展，在ざい1994年ねん已やめ有ゆう实验室しつ报道了りょうCre-Lox重じゅう组可以用于小しょう鼠ねずみT细胞发育中ちゅう的てき条件じょうけん性せい基もと因いん敲除。[6] 之これ后きさき的てき文献ぶんけん中重なかしげ组的效率こうりつ不断ふだん提ひさげ高だか，[7] 但ただし是ぜ当とう细胞中有ちゅうう两份floxed序列じょれつ时，由ゆかり于Cre酶活性せい问题，不完全ふかんぜん的てき敲除仍是常つね见情况。

Cre-Lox技わざ术的发展使し生物せいぶつ医学いがく研究けんきゅう中ちゅう条件じょうけん性せい诱变得え到いた广泛使用しよう，使つかい之の成なり为确定てい特殊とくしゅ细胞类型和わ发育阶段中ちゅう基もと因いん功こう能のう的てき主流しゅりゅう方法ほうほう，特とく别是神かみ经生物せいぶつ学がく领域。[8]

概がい览

[编辑]

Cre-Lox重じゅう组，即そく对一いち段だん特定とくてい的てきDNA序列じょれつ进行定位ていい，并用Cre重じゅう组酶对其进行剪接。这一技わざ术常用じょうよう于避免めん研究けんきゅう中ちゅう系けい统性的てき多た基もと因いん失しつ活かつ带来的てき胚胎はいたい致死ちし情じょう况。[9][10] 此外，对转基因いん动物模型もけい中ちゅう基もと因いん型がた（基もと因いん组DNA的てき改あらため变）和わ表ひょう型がた（生物せいぶつ学がく功こう能のう的てき变化）之の间关系けい的てき判断はんだん，Cre-Lox技わざ术也提供ていきょう了りょう当とう前ぜん最さい好このみ的てき实验对照控ひかえ制せい。[8][11]

Cre蛋白たんぱく是ぜ一个位点特异性DNA重じゅう组酶，它能够催化かDNA分ぶん子中こなか特定とくてい位い点てん之の间的重じゅう组。这些位い点てん就是loxP位い点てん，其两端はし包含ほうがん了りょう可か以让Cre特とく异性结合的てき序列じょれつ，围绕着ぎ一个有方向性的核心序列，而DNA重じゅう组就发生在ざい核心かくしん序列じょれつ上じょう。

一张图表描述了如何使用 Lox71和わ Lox66位い点てん将はた两个质粒组合成ごうせい一个连续的质粒。

当とう一个基因组中含有loxP位い点てん的てき细胞表ひょう达Cre蛋白たんぱく时，DNA重じゅう组就可能かのう会かい发生在ざいloxP位い点てん之の间。Cre重じゅう组酶蛋白たんぱく会かい分ぶん别与一いち个loxP位い点てん的てき前まえ13bp和わ后きさき13bp区域くいき结合，形成けいせい一いち个二に聚体；这个二聚体又会和另一个loxP位い点てん上じょう的てき二聚体结合成一个四聚体。Lox位い点てん是ぜ有ゆう方向ほうこう性せい的てき，而两个由四聚体连接的位点在方向上是平行的。Cre蛋白たんぱく将しょう把わ两个位い点てん的てきDNA双そう链都切きり开，而DNA连接酶将はた快速かいそく将はた其重新しん连接。重じゅう组的结果取と决于LoxP位い点てん的てき定じょう向むこう，对同一条染色体臂上的两个位点，反たん向むかい的てき情じょう况将会かい导致目め标序列じょれつ的てき倒たおせ位い，而同向むこう的てき情じょう况将导致其被直接ちょくせつ删除；如果两个位い点てん位い于两条じょう不同ふどう的てき染色せんしょく体たい上じょう，则可能かのう引发染色せんしょく体たい易えき位い。Lox变体可用かよう于两个质粒つぶ的てき连接。[12]

Cre 重じゅう组酶

[编辑]

Cre蛋白たんぱく（最初さいしょ由よし“导致重じゅう组（Cause recombination）”命名めいめい，也有やゆう文献ぶんけん是ぜ“环化重じゅう组酶（Cyclization recombinase）”）由よし4个亚基もと组成，全ぜん蛋白たんぱく有ゆう343个氨基酸さん残ざん基もと，2个结构域：较大的てきC-末端まったん结构域いき，和かず较小的てきN-末端まったん结构域いき。[13][14] C-末端まったん结构域いき在ざい结构上じょう和わλらむだ噬菌体たい中分なかぶん离出的てき整合せいごう酶家族かぞく有ゆう相似そうじ性せい，这也是ぜCre酶的催化活性かっせい位い点てん。

loxP位い点てん

[编辑]

loxP（Locus Of X-over P1）是ぜP1噬菌体たい基もと因いん组中34bp的てき特殊とくしゅ位い点てん序列じょれつ。序列じょれつ由よし8bp的てき不ふ对称序列じょれつ（决定了りょうloxP序列じょれつ的てき方向ほうこう），和かず不ふ对称序列じょれつ两边的てき两段13bp对称序列じょれつ组成，具体ぐたい序列じょれつ见下：“N”代表だいひょう这个碱基是ぜ可か变的，小しょう写字しゃじ母はは则表示ひょうじ这个碱基是ぜ从野生やせい型がた突变而来。在ざい基もと因いん操作そうさ中ちゅうloxP序列じょれつ一いち般成对使用しよう，被ひ一いち对loxP序列じょれつ包つつみ围的序列じょれつ称しょう为floxed序列じょれつ。如果floxed序列じょれつ两侧的てきloxP序列じょれつ方向ほうこう相しょう同どう，floxed序列じょれつ将しょう会かい被ひ删除；而如果はて两侧的てきloxP序列じょれつ方向ほうこう相反あいはん，floxed序列じょれつ将しょう会かい发生倒たおせ位い。如果有ゆう另一いち段だん外がい源げん的てきfloxed序列じょれつ，两者可能かのう发生重じゅう组，这称为重じゅう组酶介かい导的盒交换。这是一种十分方便省时的基因重组技术，但ただし是ぜ由よし于可能かのう发生反はん向むかい重しげる组和反はん式しき删除，重じゅう组效率りつ可能かのう较低，loxP序列じょれつ的てき突变形式けいしき即そく是ぜ用よう于解决这些问题。[15]

13bp 8bp 13bp
ATAACTTCGTATA - NNNTANNN -TATACGAAGTTAT
Example Alternate loxP Sites[16]
名称めいしょう 13bp 识别区く 8bp 不ふ对称区く 13bp 识别区く
Wild-Type ATAACTTCGTATA ATGTATGC TATACGAAGTTAT
lox 511 ATAACTTCGTATA ATGTATaC TATACGAAGTTAT
lox 5171 ATAACTTCGTATA ATGTgTaC TATACGAAGTTAT
lox 2272 ATAACTTCGTATA AaGTATcC TATACGAAGTTAT
M2 ATAACTTCGTATA AgaaAcca TATACGAAGTTAT
M3 ATAACTTCGTATA taaTACCA TATACGAAGTTAT
M7 ATAACTTCGTATA AgaTAGAA TATACGAAGTTAT
M11 ATAACTTCGTATA cgaTAcca TATACGAAGTTAT
lox 71 TACCGTTCGTATA NNNTANNN TATACGAAGTTAT
lox 66 ATAACTTCGTATA NNNTANNN TATACGAACGGTA

位い点てん特とく异性重じゅう组

[编辑]

位い点てん特とく异性重じゅう组（Site-Specific Recombination）和わ一般的同源重组相对，是ぜ指ゆび在ざいDNA上じょう的てき特定とくてい位い点てん发生的てき由よし特定とくてい重じゅう组酶介かい导的重じゅう组过程ほど。

在原ありわら核かく和わ真ま核かく细胞中ちゅう，都と已やめ经有一些位点特异性重组系统被发现和描述，基本きほん上じょう它们都と是ぜ利用りよう一个或多个蛋白对非对称的DNA序列じょれつ进行特とく异性识别操作そうさ，生成せいせい非ひ对称DNA序列じょれつ的てき方向ほうこう所しょ决定的てき重じゅう组产物ぶつ。除じょ了りょう重じゅう组酶外がい，一般还有一些其他蛋白会对重组过程进行调控。

作用さよう机つくえ理り

[编辑]

位い点てん特とく异性重じゅう组由重じゅう组蛋白しろ对其特とく异性识别的てきDNA序列じょれつ进行结合开始，一个重组酶一般可以结合同一个DNA分子ぶんし或ある两个DNA分子ぶんし上じょう的てき两个特とく异性位い点てん。结合上じょう去さ后きさき，重じゅう组酶的てき酪氨酸さん残ざん基もと会かい与あずかDNA分子ぶんし的てき磷酸基もと团发生せい转酯化か反はん应，将はた酶蛋白和しらわDNA连接起おこり来らい，这一步反应保存了磷酸二酯键中的能量，使つかい其不需要じゅよう高だか能のう辅因子いんし也可以发生せい逆ぎゃく反はん应。

另一いち条じょうDNA链上也发生せい了りょう相しょう同どう的てき反はん应，这样就在两条链的骨こつ架か上分かみぶん别暴露ばくろ了りょう两个游ゆう离的3'羟基，这时的てきDNA-酶复合ごう物ぶつ即そく是ぜ反はん应的中ちゅう间体。下した一いち步ほ，DNA上じょう游ゆう离的3'羟基会かい与あずか另一いち条じょうDNA上うえ的てき5'磷酸基もと团共价连接せっ，并使后きさき者しゃ和重かずえ组酶上じょう的てき酪氨酸さん残ざん基もと解かい离，生成せいせい重じゅう组反应中的てき霍利迪すすむ交叉こうさ。

这样，两条原本げんぽん并不相しょう连的DNA链连接せっ在ざい了りょう一いち起おこり，再さい通つう过后续的酶切和わ连接，两端DNA序列じょれつ发生了りょう互相交换，蛋白たんぱく质之间的相互そうご作用さよう促进并指导了这个过程的てき进行。

当とう某ぼう些病毒びょうどく，比ひ如一些噬菌体侵染细菌细胞时，会かい将はた自己じこ的てき遗传物ぶつ质整合せいごう进宿主しゅくしゅ的てき基もと因いん组中。发生整合せいごう的てき特とく异性位い点てん称しょう作さくatt（attachment）位い点てん，在ざい上述じょうじゅつ过程中ちゅう，病毒びょうどくDNA上じょう的てきattA位い点てん与あずか细菌DNA上じょう的てきattB位い点てん发生重じゅう组，而其他た位い点てん不ふ会かい发生，这就属ぞく于位点てん特とく异性重じゅう组的例れい子こ。

效率こうりつ

[编辑]

现已发现两个因いん素もと会かい影かげ响Cre-lox重じゅう组的效率こうりつ。第だい一いち个因素もと是ぜlox序列じょれつ中ちゅう不ふ对称区く段だん的てき碱基序列じょれつ，突变的てきlox序列じょれつ会かい表ひょう现出与野よの生せい型がた不同ふどう的てき重じゅう组效率りつ，但ただし一般いっぱん低てい于野生やせい型がた。推测这可能かのう是ぜ因いん为突变的碱基影かげ响了反はん应中间体的てき生成せいせい和解わかい离。[17]

第だい二个影响因素是一对lox序列じょれつ之の间floxed序列じょれつ的てき长度，Cre-lox重じゅう组的效率こうりつ随ずい着ぎ其长度ど的てき增大ぞうだい而降低てい，或ある许是因いん为反应动力学りきがく的てき影かげ响。[18][19][20] floxed序列じょれつ在ざい基もと因いん组中的てき位置いち会かい对Cre重じゅう组酶的てき结合有ゆう影かげ响，也会影かげ响重组效率りつ。[20] 此外，cre基もと因いん的てき启动子こ选择也很重要じゅうよう，低てい表ひょう达的启动子こ往往おうおう会かい造成ぞうせい异常的てき重じゅう组结果はて。[20]

时间控ひかえ制せい

[编辑]

在ざいCre-Lox重じゅう组系统中常用じょうよう的てき表ひょう达调控ひかえ机つくえ制せい还有三さん苯氧胺诱导系けい统。[21]通つう过在Cre酶的蛋白たんぱく序列じょれつ上じょう添加てんか一个雌激素受体结构域いき，可か以实现重组反应在特定とくてい时间点てん的てき触さわ发。重じゅう组过后きさき的てきCre酶在没ぼつ有ゆう三苯氧胺的情况下会被运输到细胞质中なか，不能ふのう介かい导重组反应；当とう我わが们加入かにゅう三さん苯氧胺后，三苯氧胺可以与Cre蛋白たんぱく上じょう的てき受体结构域いき结合，并导致其被ひ运送到いた细胞核かく中なか，从而使し重じゅう组反应可以进行ぎょう。[22]

Cre-lox系けい统的自然しぜん功こう能のう

[编辑]

P1噬菌体たい是ぜ一いち种温和おんわ噬菌体たい，既すんで可か以进行ぎょう裂きれ解かい循环也可以进行ぎょう溶源循环。在ざい裂きれ解かい循环的てき情じょう况下，一旦噬菌体的基因组进入细菌体内，噬菌体たい的てき蛋白たんぱく就开始はじめ表おもて达，新しん的てき病毒びょうどく粒子りゅうし开始组装，细菌很快就会裂きれ解かい并释放出ほうしゅつ大量たいりょう新しん的てき噬菌体たい，从而继续这个循环；在ざい溶源循环中ちゅう，噬菌体たい的てき基もと因いん组将和わ宿主しゅくしゅ的てき基もと因いん组共存きょうぞん，并在宿主しゅくしゅ分裂ぶんれつ时传入子いれこ细胞，直ちょく到いた某ぼう些刺激しげき（紫むらさき外がい线、饥饿等とう）导致其转入にゅう裂きれ解かい循环。

温和おんわ噬菌体たい中ちゅう，有ゆう的てき会かい像ぞうλらむだ噬菌体たい一いち样，在ざい溶源期き间将其基因いん组整合せいごう进宿主しゅくしゅ的てき基もと因いん组内うち。但ただし是ぜP1噬菌体たい的てき基もと因いん组则是ぜ以质粒的てき形式けいしき存在そんざい于宿主しゅくしゅ的てき细胞内ない，这时Cre-lox系けい统就会かい发挥功こう能のう：帮助环化线性的てき噬菌体たいDNA、分ぶん开复制せい后きさき连结的てき两个质粒DNA分子ぶんし使し其平均へいきん分配ぶんぱい到いた两个子こ细胞中ちゅう，还可能かのう作さく为备选的复制方式ほうしき来らい维持质粒DNA的てき拷贝数すう。[23]

多た对loxP位い点てん的てき插入そうにゅう

[编辑]

多た种loxP的てき变体，[24] 特とく别是lox2272和わloxN，被ひ用よう于产生せい不同ふどうCre-lox重じゅう组（诱导的てき和わ组成的てき）的てき结合体がったい，从而实现小しょう鼠ねずみ脑部多た达4种的荧光显色（“Brainbow”系けい统）。

参考さんこう文献ぶんけん

[编辑]
  1. ^ Turan, S.; Galla, M.; Ernst, E.; Qiao, J.; Voelkel, C.; Schiedlmeier, B.; Zehe, C.; Bode, J. Recombinase-mediated cassette exchange (RMCE): traditional concepts and current challenges. J. Mol. Biol. 2011, 407 (2): 193–221. PMID 21241707. doi:10.1016/j.jmb.2011.01.004. 
  2. ^ Sauer, B. Functional expression of the Cre-Lox site-specific recombination system in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Mol Cell Biol. 1987, 7 (6): 2087–2096. PMC 365329 可免费查阅. PMID 3037344. doi:10.1128/mcb.7.6.2087. 
  3. ^ Sauer, B.; Henderson, N. Site-specific DNA recombination in mammalian cells by the Cre recombinase of bacteriophage P1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988, 85 (14): 5166–5170. PMC 281709 可免费查阅. PMID 2839833. doi:10.1073/pnas.85.14.5166. 
  4. ^ Orban, P.C.; Chui, D.; Marth, J.D. Tissue– and site–specific recombination in transgenic mice. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992, 89: 6861–6865. PMC 49604 可免费查阅. doi:10.1073/pnas.89.15.6861. 
  5. ^ Gu, H.; Zou, Y.R.; Rajewsky, K. Independent control of immunoglobulin switch recombination at individual switch regions evidenced through Cre–loxP–mediated gene targeting. Cell. 1993, 73: 1155–1564. doi:10.1016/0092-8674(93)90644-6. 
  6. ^ Gu, H.; Marth, J.D.; Orban, P.C.; Mossman, H.; Rajewsky, K. Deletion of the DNA polymerase beta gene in T cells using tissue-specific gene targeting. Science. 1994, 265: 103–106. doi:10.1126/science.8016642. 
  7. ^ Hennet; et al. T-cell specific deletion of a polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase gene by site-directed recombination. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995, 92: 12070–74. PMC 40298 可免费查阅. doi:10.1073/pnas.92.26.12070. 
  8. ^ 8.0 8.1 Tsien, JZ.; et al. The essential role of hippocampal CA1 NMDA receptor–dependent synaptic plasticity in spatial memory. Cell. 1996b, 87 (7): 1327–38. PMID 8980238. doi:10.1016/s0092-8674(00)81827-9. 
  9. ^ Shen, J; et al. Skeletal and CNS defects in Presenilin-1-deficient mice. Cell. 1997, 89 (4): 629–39. PMID 9160754. doi:10.1016/s0092-8674(00)80244-5. 
  10. ^ Li, Y; et al. Whisker-related neuronal patterns fail to develop in the trigeminal brainstem nuclei of NMDAR1 knockout mice. Cell. 1994, 76 (3): 427–37. PMID 8313466. doi:10.1016/0092-8674(94)90108-2. 
  11. ^ Feng, R; et al. Deficient neurogenesis in forebrain-specific presenilin-1 knockout mice is associated with reduced clearance of hippocampal memory traces. Neuron. 2001, 32 (5): 911–26. PMID 11738035. doi:10.1016/s0896-6273(01)00523-2. 
  12. ^ Hastie; Pruitt. Yeast two-hybrid interaction partner screening through in vivo Cre-mediated Binary Interaction Tag generation. Nucleic Acids Research. 2007, 35 (21): e141 [2019-06-11]. doi:10.1093/nar/gkm894. （原始げんし内容ないよう存そん档于2018-04-17）. 
  13. ^ Https: / / www.ncbi.nlm.nih. gov / protein / aav84941.1. [2019-06-11]. （原始げんし内容ないよう存そん档于2018-04-17）. 
  14. ^ Sternberg; Hamilton. Bacteriophage P1 site-specific recombination. J. Mol. Biol. 1981, 150: 467–486 [468]. doi:10.1016/0022-2836(81)90375-2. 
  15. ^ Araki, K. Targeted integration of DNA using mutant lox sites in embryonic stem cells. Nucleic Acids Research. 1997, 25 (4): 868–872. PMC 146486 可免费查阅. PMID 9016639. doi:10.1093/nar/25.4.868. 
  16. ^ Missirlis, P. I.; Smailus, D. E.; Holt, R. A. A high-throughput screen identifying sequence and promiscuity characteristics of the loxP spacer region in Cre-mediated recombination. BMC Genomics. 2006, 7: 73. PMC 1479339 可免费查阅. PMID 16595017. doi:10.1186/1471-2164-7-73. 
  17. ^ Lee, G; Saito, I. Role of nucleotide sequences of loxP spacer region in Cre-mediated recombination. Gene. 1998, 216 (1): 55–65. PMID 9714735. doi:10.1016/s0378-1119(98)00325-4. 
  18. ^ S-z, Wang; B-h, Liu; Tao, HW; Xia, K; Zhang, LI. A Genetic Strategy for Stochastic Gene Activation with Regulated Sparseness (STARS). PLoS ONE. 2009, 4 (1): e4200. PMC 2615212 可免费查阅. PMID 19145242. doi:10.1371/journal.pone.0004200. 
  19. ^ Zheng, B; Sage, M; Sheppeard, EA; Jurecic, V; Bradley, A. Engineering Mouse Chromosomes with Cre-loxP: Range,Efficiency, and Somatic Applications. Molecular and Cellular Biology. 2000, 20 (2): 648–655. PMC 85158 可免费查阅. PMID 10611243. doi:10.1128/mcb.20.2.648-655.2000. 
  20. ^ 20.0 20.1 20.2 Liu, J; Willet, SG; Bankaitis, ED. Non-parallel recombination limits Cre-LoxP-based reporters as precise indicators of conditional genetic manipulation. Genesis. 2013, 51 (6): 436–42. PMC 3696028 可免费查阅. PMID 23441020. doi:10.1002/dvg.22384. 
  21. ^ Walrath, CJ; Hawes, JJ; Dyke, VT; Reilly, MK. Chapter 4 - Genetically engineered mouse models in cancer research. Advances in Cancer Research. 2010, 106: 113–164. ISBN 9780123747716. PMC 3533445 可免费查阅. PMID 20399958. doi:10.1016/S0065-230X(10)06004-5. 
  22. ^ Kristianto, J; Johnson, MG; Zastrow, RK; Radcliff, AB; Blank, RD. Spontaneous recombinase activity of Cre-ERT2 in vivo. Transgenic Research. 2017, 26 (3): 411–417. PMID 28409408. doi:10.1007/s11248-017-0018-1. 
  23. ^ Łobocka, Małgorzata B.; Debra J. Rose; Guy Plunkett; Marek Rusin; Arkadiusz Samojedny; Hansjörg Lehnherr; Michael B. Yarmolinsky; Frederick R. Blattner. Genome of Bacteriophage P1. Journal of Bacteriology. November 2004, 186 (21): 7032–7068 [2019-06-11]. ISSN 0021-9193. PMC 523184 可免费查阅. PMID 15489417. doi:10.1128/JB.186.21.7032-7068.2004. （原始げんし内容ないよう存そん档于2018-06-02）. 
  24. ^ Editor's Summary (1 November 2007) Over the brainbow （页面存そん档备份，存そん于互联网档案あん馆）. Nature. Accessed 15 March 2010.

外部がいぶ链接

[编辑]
检索自じ“https://zh.wikipedia.org/w/index.php?title=Cre-Lox重じゅう组&oldid=69716552”